פרגמנט סינתטי הקשור ל-Thymosin beta-4, הנחקר בהקשר של אקטין, נדידת תאים וריפוי רקמות
סקירה כללית
TB-500 הוא שם נפוץ לפפטיד סינתטי הקשור ל-Thymosin beta-4, חלבון טבעי בן 43 חומצות אמינו הנמצא ברוב תאי הגוף. Thymosin beta-4 מוכר כחלבון הקושר G-actin ומשתתף בבקרה על דינמיקת שלד התא, תנועה תאית, נדידת תאים ותהליכי תיקון רקמות [1,3].הבחנה מרכזית היא בין Thymosin beta-4 המלא לבין TB-500. בספרות בדיקות הסמים ובמסמכי רגולציה TB-500 מזוהה בדרך כלל כפרגמנט קצר של Thymosin beta-4, בעיקר הרצף LKKTETQ, ולעיתים כגרסה אצטילית Ac-LKKTETQ, כלומר חומצות אמינו 17 עד 23 מתוך החלבון המלא [1,2,7].הבחנה זו חשובה מאוד. חלק גדול מהראיות המחקריות על ריפוי פצעים, קרנית, לב ואנגיוגנזה נוגע ל-Thymosin beta-4 המלא, ולא בהכרח ל-TB-500 כפרגמנט קצר. לכן אי אפשר להעתיק באופן אוטומטי מסקנות ממחקרי Thymosin beta-4 אל TB-500 [3-6].
מנגנון ביולוגי
Thymosin beta-4 מעורב בקשירת G-actin, כלומר אקטין מונומרי, ובכך משפיע על זמינות אקטין לבניית סיבי אקטין בתוך התא [3]. דינמיקת אקטין חיונית לשינוי צורת התא, תנועה, נדידה, חלוקת תאים ותגובה לפציעה.בריפוי פצעים, תאים צריכים לנוע אל אזור הפגיעה, להיצמד למטריצה, לייצר חלבונים חדשים ולארגן מחדש את הרקמה. מחקר מוקדם הראה כי Thymosin beta-4 מאיץ ריפוי פצעים במודלים ניסיוניים, בין היתר דרך השפעה על נדידת קרטינוציטים ותאי אנדותל [3].מחקר נוסף הציע כי אזור קשירת האקטין של Thymosin beta-4 מקדם אנגיוגנזה, כלומר יצירת כלי דם חדשים [4]. אנגיוגנזה יכולה לתמוך בשיקום רקמה, אך היא גם תהליך ביולוגי רגיש, המעורב במצבים כמו דלקת כרונית וגידולים. לכן פעילות כזו דורשת הערכת בטיחות מדויקת.
ראיות מחקריות
מחקר משנת 2012 אפיין את הפרגמנט האצטילי של חומצות אמינו 17-23 מתוך Thymosin beta-4, המזוהה עם TB-500, בהקשר של חומר בעל פוטנציאל דופינג [1]. מחקר נוסף פיתח שיטות גילוי ל-TB-500 בנוזלים ביולוגיים בסוסים, מה שמדגיש את השימוש בשם TB-500 בעיקר בהקשר של בדיקות סמים וחשיפה בלתי מאושרת, ולא כתרופה מבוססת [2].לצד זאת, מחקרי Thymosin beta-4 המלא הציגו ממצאים ביולוגיים משמעותיים. במחקרי עור נמצא עידוד ריפוי פצעים [3]. במחקר ב-FASEB Journal נמצא כי אזור קשירת האקטין תורם לאנגיוגנזה [4]. במחקר Nature משנת 2004 נמצא כי Thymosin beta-4 מפעיל integrin-linked kinase, תומך בנדידת תאים לבביים ואנדותליאליים, מפחית מוות תאי ומקדם תיקון לבבי במודלים ניסיוניים [5].בתחום העיניים, תמיסות מחקריות של Thymosin beta-4 נבדקו ביובש עיני ובמצבים של פגיעה באפיתל הקרנית, כולל מחקרים מבוקרים בפורמולציות מקומיות [6]. גם כאן מדובר בעיקר ב-Thymosin beta-4 המלא או בפורמולציות מוגדרות, ולא בהוכחה ישירה לגבי TB-500 כפרגמנט קצר.
הבלבול בין TB-500 לבין Thymosin beta-4 מלא
אחת הבעיות המרכזיות בספרות ובשיח סביב TB-500 היא ערבוב בין הפרגמנט הקצר לבין Thymosin beta-4 המלא. TB-500 מזוהה במחקרי דופינג כפרגמנט Ac-LKKTETQ או כרצף LKKTETQ, ואילו Thymosin beta-4 המלא הוא חלבון ארוך יותר בן 43 חומצות אמינו [1,2]. כאשר מחקר מתאר פעילות ביולוגית של Tβ4 המלא, אין להניח אוטומטית שאותה פעילות מתקיימת במלואה גם בפרגמנט הקצר.הסיבה לכך היא שחלבונים ופפטידים פועלים לא רק לפי "אזור פעיל" אחד. המבנה המלא יכול להשפיע על יציבות, קישור לחלבונים אחרים, פירוק, חדירה לרקמה, פיזור ביולוגי ואינטראקציות עם מסלולים נוספים. הפרגמנט LKKTETQ קשור לאזור האקטין ולנדידת תאים, אך Tβ4 המלא עשוי לכלול תכונות נוספות שאינן משוחזרות בפרגמנט [1-5].הראיות הקליניות המתקדמות יחסית אינן מגיעות מ-TB-500 כמוצר מערכתי, אלא מפורמולציות מחקריות של Thymosin beta-4 מלא, בעיקר בעין ובעור [6-8]. לדוגמה, RGN-259 הוא תכשיר עיני שנבדק ביובש עיני ובקרטופתיה נוירוטרופית [7,8]. תוצאות אלה חשובות, אך הן אינן מוכיחות יעילות של TB-500 קצר בפציעות גידים, שרירים או רצועות.דינמיקת אקטין, נדידת תאים ואנגיוגנזה הם מסלולים חיוניים לריפוי, אך גם מסלולים שיש לפרש בזהירות. תנועה תאית ויצירת כלי דם עוזרות לסגור פצע ולשקם רקמה, אך במצבים אחרים הן יכולות להיות מעורבות בדלקת כרונית, פיברוזיס ותהליכים גידוליים. לכן, העניין ב-TB-500 אינו רק "ריפוי מהיר", אלא הבנה של מערכת תיקון תאית שיכולה להיות מועילה או בעייתית לפי ההקשר הביולוגי [3-5].מבחינה רגולטורית, ה-FDA וגורמי אנטי דופינג מתייחסים ל-TB-500 כאל חומר בעל סוגיות איכות, זהות ובטיחות. בעיות של אצטילציה, זיהוי רצף, אי ניקיונות פפטידיים ואפיון API אינן שוליות, משום שפפטיד קצר ושגוי או מזוהם יכול להיות שונה משמעותית מהמולקולה הנחקרת [1,2,8].
בטיחות ורגולציה
ה-FDA מתייחס ל-Thymosin beta-4 fragment LKKTETQ, הידוע גם כ-TB-500, כחומר שעשוי להעלות חששות בטיחותיים בהקשר של רקיחה. החששות כוללים אימונוגניות, אגרגציה, אי ניקיונות פפטידיים ואתגרי אפיון של החומר הפעיל. בנוסף, מצוין חוסר בנתוני חשיפה אנושית מספקים עבור מוצרי תרופה המכילים את הפרגמנט [7].בתחום הספורט התחרותי, Thymosin beta-4 ונגזרותיו, כולל TB-500, מופיעים בהקשרים של חומרים אסורים או בדיקות דופינג [2,8]. עובדה זו רלוונטית במיוחד משום ש-TB-500 נפוץ בשיח סביב התאוששות ופציעות ספורט, בעוד שהראיות הקליניות הישירות בבני אדם דלות.מגבלה בטיחותית נוספת היא אופיו הביולוגי של המסלול. עידוד נדידת תאים ואנגיוגנזה עשוי להיות מועיל בהקשר של תיקון רקמה, אך עלול להיות בעייתי במצבים אחרים. לכן אין להסיק מממצאי ריפוי במודלים ניסיוניים על בטיחות כללית בבני אדם.
ראיות קליניות עקיפות מול טענות שימוש רחבות
המחקר על Thymosin beta-4 המלא בעין ובעור מספק בסיס מעניין להבנת ריפוי אפיתל, נדידת תאים והפחתת דלקת [6-8]. אולם כאשר אותם ממצאים מועברים לשיח על TB-500 בפציעות שריר-שלד, נוצרת קפיצה ראייתית. פגם בקרנית או פצע עור שטחי שונים מאוד מקרע בגיד, פגיעה בשריר או שיקום רקמת לב. לכל רקמה יש כלי דם, עומסים מכניים, תאי מטרה ומסלולי ריפוי שונים.גם מחקרי דופינג עצמם מדגישים שמדובר במולקולה שנבחנה בהקשר של זיהוי וכימיה אנליטית, לא בהכרח בהקשר טיפולי בבני אדם [1,2]. העובדה שניתן לזהות פרגמנט בשתן או בפלזמה אינה מוכיחה פעילות קלינית. היא כן מבהירה שקיימת בעיה של זיהוי חומר, הבדל בין פרגמנט למולקולה מלאה, והצורך להפריד בין שמות שיווקיים לבין כימיה מדויקת.מבחינת בטיחות, הפער העיקרי הוא חוסר בנתוני חשיפה אנושית ישירה עבור TB-500 כפרגמנט קצר. נתונים על Tβ4 מלא בפורמולציות מקומיות אינם מכסים חשיפה מערכתית לפרגמנט קצר. לכן, הערכת הסיכון צריכה לכלול לא רק תופעות לוואי מדווחות, אלא גם שאלות על אימונוגניות, יציבות, תוצרי פירוק, אנגיוגנזה לא רצויה ורגולציה בספורט [1,2,8].
סיכום
TB-500 הוא פרגמנט סינתטי הקשור לאזור פעיל של Thymosin beta-4, ואינו זהה בהכרח לחלבון המלא [1,2]. Thymosin beta-4 נחקר במסלולי אקטין, נדידת תאים, אנגיוגנזה ותהליכי רקמה [3-6], אך הראיות הישירות על TB-500 כפרגמנט קצר בבני אדם מוגבלות מאוד, וה-FDA מציין חוסר בנתוני חשיפה אנושית לצד חששות איכות ואפיון [7]. החומר מיועד למחקר מעבדתי בלבד.
מקורות מחקריים נבחרים
- Esposito S. et al. Synthesis and characterization of the N-terminal acetylated 17-23 fragment of thymosin beta 4 identified in TB-500. Drug Testing and Analysis, 2012. PMID: 22962027
- Ho E.N.M. et al. Doping control analysis of TB-500, a synthetic version of an active region of thymosin beta 4, in equine urine and plasma. Journal of Chromatography A, 2012. PMID: 23084823
- Malinda K.M. et al. Thymosin beta4 accelerates wound healing. Journal of Investigative Dermatology, 1999. PMID: 10469335
- Philp D. et al. The actin binding site on thymosin beta4 promotes angiogenesis. FASEB Journal, 2003. PMID: 14500546
- Bock-Marquette I. et al. Thymosin beta4 activates integrin-linked kinase and promotes cardiac cell migration, survival and cardiac repair. Nature, 2004. PMID: 15565145
- Sosne G. et al. Thymosin beta 4 ophthalmic solution for dry eye: a randomized, placebo-controlled, Phase II clinical trial. Clinical Ophthalmology, 2015. PMID: 26056426
- U.S. Food and Drug Administration. Safety risks associated with certain bulk drug substances nominated for use in compounding. Entry for Thymosin beta-4 fragment LKKTETQ, also known as TB-500. FDA.gov
- USADA. 2018 Prohibited List: Summary of Major Changes, addition of Thymosin beta-4 and derivatives such as TB-500. USADA.org
